火影忍者幻之试炼3中大蛇丸的挑战需要结合特定触发条件与战斗策略。首先需进入光门后向左移动，攻击左上角露出的蛇头以触发晓大蛇丸战斗，该机制存在概率性，若未成功需重复尝试。战斗中需注意晓大蛇丸开启红色反伤护罩时立即停手，通过走位规避技能，待其进入虚弱状态后集中普攻输出。击败后可获得普攻强化奖励箱，该战斗对角色属性和连招技巧有较高要求。
秘卷选择直接影响战斗容错率，推荐携带一字连柱或豪火球术，后者可远程消耗BOSS。属性强化优先选择百分比加成类秘卷，普攻回血或回能量类效果能显著提升续航能力。角色方面奇拉比凭借多段位移和技能衔接优势成为推荐选择，其连招顺序为平A接转圈（技能后跳剑（技能，第三关后需先用豪火球破除敌人霸体再衔接连招。平A主要用于拖延秘卷冷却时间，若获得50%概率刷新秘卷的增益可大幅降低操作压力。
晓大蛇丸的红色护罩持续期间任何攻击都会反弹伤害，应保持Y轴移动规避地面蛇形攻击。第二阶段其会召唤蛇群形成范围吸附，需提前保留替身术脱离。最终虚弱阶段会降低移动速度但提升攻击频率，建议保持中距离用秘卷输出，避免被连续抓取。关卡中存在时间限制机制，拖延过久会导致BOSS狂暴化。通关后解锁的幻神称号需满足特殊条件。除常规击败晓大蛇丸外，需在第五关满血战胜角都才有概率触发隐藏第六关须佐鼬，该BOSS的天照技能会造成持续燃烧伤害。
